D-Luciferin potassium salt (D-荧光素钾盐)使用说明下载
产品描述
D-荧光素(D-Luciferin) 是荧光素酶(Luciferase) 的常用底物，普遍应用于整个生物技术领域， 特别是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下， 荧光素(底物)能够被氧化发光。当荧光素过量时，产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性(见下图) 。将携带荧光素脚编码基因 ( Luc ) 的质粒转染入细胞后，导入研究动物如大、小鼠体内，之后注入荧光素，通过生物发光成像技术( BL )来检测光强度变化，从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响，根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。
D-荧光素也常用于体外研究， 包括荧光素酶和ATP水平分析； 报告基因分析； 高通量测序和各种污染检测。目前有三种产品形式：D-荧光素(游离酸)，D-荧光素盐(钠盐和钾盐)。主要差别在于溶解特性：前者的水溶性以及缓冲体系的溶解性都较弱，除非溶于弱碱如低浓度NaOH和KOH溶液。可溶于甲醇和DMSO； 后者能够易溶于水或缓冲液中，使用方便，溶剂无毒性，特别适合体内实验。配成溶液后的这三种产品，在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。
产品信息
中文名称 | D-荧光素钾盐 |
英文别称 | (S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt;D-Luciferin firefly, potassium salt |
CAS号 | 115144-35-9 |
分子式 | C11H7N203S2K |
分子量 | 318.42 g/mol |
外观 | 淡黄色粉末 |
溶解性 | 易溶于水(60mg/mL) |
纯度（HPLC） | >95% |
产品信息
Cat.No | 产品名称 | 规格 | 储存条件 | 保质期 |
IMC-813-25 mg | D-Luciferin potassium salt (D-萤光素钾盐) | 25 mg | -25~ -15℃干燥避光 | 12个月 |
IMC-813-100 mg | D-Luciferin potassium salt (D-萤光素钾盐) | 100 mg | -25~ -15℃干燥避光 | 12个月 |
IMC-813-500 mg | D-Luciferin potassium salt (D-萤光素钾盐) | 500 mg | -25~ -15℃干燥避光 | 12个月 |
存储条件
-25~ -15℃干燥避光存储，有效期1年。
使用说明
1.体外生物发光检测
(1).用PBS溶解D-荧光素钾盐，配制成30mg/mL的储存液(100-200×)，混匀。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。
(2).用PBS将储存液稀释至0.15-0.3mg/mL的工作液浓度。
(3).去除培养细胞的原细胞培养基。
(4). 在进行图像分析前，取细胞密度为1×106个/mL的细胞悬液（无需进行裂解处理）置于离心管中，加入100μL的D-荧光素钾盐溶液，置于37℃的孵育箱中孵育5至10分钟。随后，将处理后的细胞悬液加入96孔板中，按标准细胞密度进行铺板，以进行后续的图像分析。
2.活体成像分析
(1).用无菌的D PBS(无Mg2+、Ca2+) 配制15mg/mL的荧光素的储存液， 混匀。
(2).用0.2um滤膜过滤除菌。立即使用，或分装于-20℃避光保存，避免反复冻融。
(3).腹腔注射(i.p.)，按照150mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射。
(4).注射入体内10-15min(待光信号达到最强稳定平台期) 后进行成像分析。
注：建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线，从而确定最高信号检测时间和信号平台期。
注意事项
1.本品 (firefly luciferin)和甲虫荧光素(beetle luciferin)仅仅是不同公司在命名上的差异，都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazo line-4-carboxylic acid。
2.注射方式、动物类型以及体重等都会影响信号的发射,因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线,确定最佳信号平台期和最佳的检测时间。
3.如果要进行ATP的检测，尽量避免外源ATP的污染,如操作时戴手套并使用ATP-free 的实验耗材，在进行荧光素的溶解时应使用ATP-free无菌水。
4.本品要进行避光操作和保存。储存液过滤除菌后可分装于-20℃或-80°C冻存。如果有条件,可对储存液充入氮气或氩气(防止氧化)，保存时间长达1年。
5.在进行D-荧光素钾盐的溶解时,应使用无钙镁离子的DPBS,因钙镁离子可能会抑制荧光素酶的活性,此外镁离子可能会对荧光素的氧化造成影响,从而影响检测。
6.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
7.本产品仅作科研用途。
