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CHO细胞的应用有哪些

时间:2021-08-26 09:51:02 点击:754次

1.CHO细胞是应用于大规模生产治疗性蛋白质和重组蛋白表达的最常见哺乳动物细胞系

由哺乳动物细胞产生的蛋白质疗法改变了人类医疗水平的格局。基于哺乳动物细胞的生物过程已用于制造病毒疫苗、诊断和治疗蛋白质。在蛋白质治疗剂的生产中,细胞是产生蛋白质的主要宿主。最广泛使用的宿主哺乳动物细胞是中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞和小鼠骨髓瘤细胞。CHO经过长期驯化和改造, 目前已经发展出多个不同的CHO细胞系, 常见的有CHO-K1、CHO-S、CHO-DXB11、CHO-DG44等。CHO-S细胞也是野生型细胞株, 与CHO-K1都来源于最原始的CHO细胞系。CHO细胞是市场上超过 70% 的蛋白质药物的首选制造宿主细胞,这是因为CHO细胞能够在无血清悬浮培养中以高密度生长,可以在延长的发酵周期中维持高水平的蛋白质表达。除此之外,CHO细胞可以在外源表达的蛋白质上掺入复杂的聚糖,典型的糖蛋白仅包含少数 N-连接聚糖,有助于蛋白质折叠和细胞内运输。当这些聚糖终止于唾液酸残基时,它们会增加对蛋白水解的抵抗力并延长体内血清半衰期。由于这些物理和药代动力学优势,重组糖蛋白表达侧重于最大化每个分子中含有唾液酸的复杂聚糖的数量。因此CHO细胞也成为被广泛用作重组蛋白表达的宿主细胞[2]。

2.CHO细胞可以对重组蛋白进行翻译后修饰

CHO细胞作为哺乳类的细胞, 与真核表达系统中的酵母细胞、果蝇细胞S9的翻译后修饰相比, 更接近人源细胞蛋白质中的修饰。CHO细胞不仅具有贴壁生长的特点, 还能在无血清无蛋白培养基中进行高密度悬浮培养, 适于大规模的工业化生产。CHO细胞隶属于成纤维细胞, 内源性蛋白分泌少, 可高效分离和纯化重组蛋白。除此之外,CHO细胞具有重组蛋白的高表达和高扩增能力。同时, CHO细胞也有着自身无法避免的遗传缺陷, 即其胞内不含脯氨酸合成基因, 导致无法将谷氨酸转变为谷氨酸-γ-半醛, 并且在它合成的过程中还需要在对应的培养基中添加辅助生长的L-脯氨酸。

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