【参考答案】
如下原因应该考虑：
1.缓冲液的pH值
2.缓冲液从冰箱内拿出后要室温恢复温度才用，过冷的缓冲液冲洗会导致细胞脱落
3.细胞培养时间过长或传代次数过多
4.你的细胞长的太满了，细胞长到80-90%就要处理
【参考答案】
你所见到的白色细胞团，所谓象菌落一样，是即将死亡的细胞，细胞用平衡盐溶液冲洗的时候，脱落下来的都是你的细胞，只能说你的细胞已经长过了，过了对数生长期，生长的活力和帖壁的能力已经下降
【参考答案】
估计是你的溶液出问题了或者是细胞长得太密了。你同时培养的其他瓶里的细胞怎么样?如果都飘起了还是要考虑所用液体(培养基及所用缓冲液)的问题，如果就这一瓶细胞这样子，估计是细胞太密了，就死了。
【参考答案】
应该是细胞状态不好所致。宜及时换液、及时传代。
【参考答案】
1、细胞密度太低了，你传代或者冻存密度太低(从你图片上看)，细胞与细胞之间相互因子不够，必然脱落。
建议：不要忙于传代或者冻存，适当地提高细胞密度试试看。
2、降低消化液密度，估计对细胞损伤较大，影响其贴壁。
3、如果上述方式还不行，在培养瓶底部适当地涂抹胶原，包被过的培养瓶会有助于细胞贴壁。
【参考答案】
我怎么感觉是污染了呢。我做原代也出现过这宗细胞大面积脱落的情况，我看你的倒置显微镜下，感觉是污染了呢。
1.一般如果是胰酶消化的问题，那细胞是圆圆的不贴壁，一换液全没了，这个问题我做原代时遇到过，我原来用0.25的胰酶消化表皮细胞，消化后是根本不贴壁，而不是表现为贴壁后大面积脱落。后来换的0.05的消化，正常贴壁生长。
2.如果是细胞密度太稀的话，那就是单个细胞不长，或者长得很慢，以前看过一个报道说细胞也是具有孤独感的，如果细胞太稀是不会体现大面积脱落的，应该是细胞增殖慢，且内部出现黑点，细胞老化才是。
3。关于包被表衬培养皿，一般直接购买的corning或者nunc这些进口的耗材培养表面都是经过处理的，易于细胞贴壁的。也有使用一些帮助贴壁的，但是那是特殊细胞，比如包被鼠尾胶来帮助肝原代细胞贴壁，包被多聚赖氨酸来帮助神经元贴壁。如果你原来做不用包被就能很好的贴壁的话，那我觉得和包不包被没有很大关系。
【参考答案】
结论：细胞生长状态差。
建议用胶原酶代替胰酶，以降低对细胞的损伤。
【参考答案】
培养箱污染是细胞污染的重要原因。正确处理方法是拆除培养箱内所有金属板、金属支架和风扇，全部用纱布沾70%酒精(要拧干)擦洗。你很可能会看到风道内(可沿风扇追踪)的大量霉菌。
甲醛熏蒸不能解决问题，因为风道内可能有大量有机物残留(灰尘、棉纤维、霉菌)，很容易再次长菌。
相关问答
-
细胞名称：A7r5细胞系（A7R5大鼠胸大动脉平滑肌细胞）客户问题：细胞中黑色的是什么？原因分析：1.棉球纤维、凋亡细胞片、血清蛋白，或一些无血清培养基添加因子后的因子析出物，属于正常现象；2.如果是传代后细胞堆···...
阅读详情 -
细胞增殖速度怎么变得这么慢了？细胞发生病变，出现细胞变圆、从培养瓶壁脱落又是什么情况？要疯了，培养细胞怎么就这么难呢~实验过程中存在的“幽灵”，即使是经验丰富的老研究员也不得不面对，没错，它就是支原体感···...
阅读详情 -
胎牛血清和小牛血清的差别在哪里？ 胎牛血清和小牛血清的差别在哪里？ 胎牛血清(FBS) :从八月龄胎牛心脏穿刺取血。适用于专业的研究和试验，包括干细胞研究、免疫分析和抗体生产。 新生牛血青/小牛血清(NBCS) :从自出···...
阅读详情 -
适合细胞长期保存的温度是多少？ 适合细胞长期保存的温度是多少？ 细胞长期保存温度是-130°C或更低。液氮罐中气态层温度在-140°C至-180°C之间细胞可保存在气态层或浸入液氮中，如果可以最好保存在气态层，因为这样···...
阅读详情 -
如何在细胞铺板时避免“边缘效应”？ 如何在细胞铺板时避免“边缘效应”？ 以下这三点一定要注意!细胞实验铺板时，为避免“边缘效应”,以应用96孔板的中间60孔为最佳，一般四周的一圈边缘孔不养细胞，只做空白或阴性···...
阅读详情 -
如何收获需要冻存的细胞?最佳是什么时候？如何收获需要冻存的细胞?最佳是什么时候？用来冻存的细胞一般选择在细胞约铺满90%的时候，这时细胞生长状态好，细胞数量也多并且在收获细胞前24小时换一次培养液。收获用来冻···...
阅读详情
