1973年,最原始的HEK293细胞来源于一个夭折的人类胚胎肾细胞中。将人的胚胎肾细胞中转化入人5型腺病毒DNA片段,得到的细胞即为HEK293细胞。HEK293细胞系有293T细胞、293T/17细胞、293T/17 SF细胞、293H细胞、293E细胞、293-6E细胞、293F细胞、293FT细胞、293FTM细胞、293S细胞、293SG细胞、293SGGD细胞。
HEK293细胞,是一个衍生自人胚胎肾细胞的细胞系,HEK293细胞极少表达细胞外配体所需的内生受体,且比较容易转染,是一个很常用的表达研究外源基因的细胞株,具有转染效率高,易于培养等特点。
HEK293细胞特点
1.转染效率高;
2.可悬浮培养用于大规模表达;
3.表达蛋白结构最接近其在人体内构象;
4.HEK293细胞在培养体系中能够快速增长,高密度培养;
5.HEK293细胞与神经元细胞一样, 对外界微环境较为敏感,利用这一-特点, 可用于药物发现及细胞毒性测试。
注:以下细胞系介绍中,HEK293细胞简称为293细胞。
HEK293细胞系种类
293T细胞
293细胞中转入SV40T-antigen基因形成的高转衍生株,即为293T细胞系。这使得包含SV40ori的质粒能够在该细胞系中显著扩增,从而促进表达载体的扩增,促进蛋白的表达。
293T细胞除了可用于各类基因表达及蛋白生产,还可用于高滴度逆转录病毒及其他病毒生产,如腺病毒及其他哺乳动物病毒。
293T/17细胞
293T细胞中共转染入pBND 和 pZAP 质粒,获得的具有G418耐受的细胞系即为293T/17细胞系。该细胞系在保有293T细胞的优良性能之外,还具有高转染性的特点。
293T/17 SF细胞
293T/17 SF细胞系指的是在293T细胞中转入EBV基因形成的转化细胞系,该细胞系主要用于细胞的瞬时转染及蛋白表达。
293H细胞
293H细胞则指的是将293细胞驯化后得到的能够在无血清培养体系下快速生长、具有高转染效率及高效蛋白表达性能的细胞系。另外,该细胞系贴附力好,而被用于噬菌斑检测等应用。
293E细胞
293E细胞指的是在293-H细胞中插入EBNA-1基因的细胞系,该基因能够稳定表达EBV病毒的EBNA1蛋白。含有EBV复制起点(oriP)的重组表达质粒,能够在H293E细胞中复制,并实现蛋白的高效表达。
293-6E细胞
293-6E细胞则是在293-H细胞中插入截短过后的EBNA-1基因的细胞系,其能够在无血清培养基中高表达生产蛋白及病毒载体。
293F细胞
293F细胞是一类能够在无血清中高表达蛋白的野生型293细胞系。
293FT细胞
293FT细胞则是在293F细胞系中插入pCMVSPORT6TAg.Neo 质粒的转化细胞系,能够快速增值,易转染,其能够用于慢病毒载体的生产。
293FTM细胞
293FTM细胞则是来源于Flp-InTMT-RETM293细胞,该细胞系中转染了ecotropic receptor质粒及MAPPIT(mammalian protein-protein interaction trap)报告质粒,该细胞系主要用于蛋白互作的筛选。
293S细胞
293S细胞则指的被驯化成能够悬浮培养且能够耐受低钙离子培养条件的293细胞系。
293SG细胞
将293S细胞用甲基磺酸乙酯诱变处理,蓖麻毒素选择后再转染pcDNA6/TR质粒得到耐受蓖麻毒素的细胞系即为293SG。
该细胞系缺乏乙酰氨基葡萄糖转移酶I活性,因此可促进蛋白的Man5GlcNAc2N-聚糖型糖基化修饰。此外,该细胞系中具有四环素表达抑制基因,可用于四环素诱导的蛋白表达研究。
这类细胞系常用于同源的N-糖基化蛋白的表达。
293SGGD细胞
293SGGD细胞系则指的是在293SG转染pcDNA3.1-zeo-STendoT质粒的细胞系,其主要用于糖基化工程研究中。
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