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A2780细胞传代背景出现了黑点,贴壁细胞减少,怎么处理?

时间:2022-03-08 17:17:33 点击:1041次

A2780细胞传代背景出现了黑点,贴壁细胞减少,怎么处理?

A2780细胞传代背景出现了黑点图片

A2780细胞传代背景出现了黑点图1

A2780细胞传代背景出现了黑点图片

A2780细胞传代背景出现了黑点图2

昨天给A2780细胞传代(我传代比例是1;3,离心后看沉淀觉得细胞还挺多的),今天发现A2780贴壁细胞减少,且背景出现了黑点,要怎么处理?以下是我A2780细胞传代步骤。

1.吸去细胞培养液,加入1mL胰酶

2.显微观察细胞边缘开始发亮皱缩,轻轻敲击瓶底有细胞开始飘落则将细胞拿至超净台,加入2ml完全培养基,把瓶底细胞吹下并吹匀细胞加入离心管中

3.800转3分钟离心细胞

4.吸去上清液,加入完全培养基吹匀细胞,将细胞转移至培养瓶中

【参考建议】

【背景有黑点原因分析

根据他说的有的消化下来也出现黑点,大概率是细胞没消化好就终止,吹打过猛,以至于出现细胞碎片

【处理方式】

下次处理可以多消化一会,直到轻轻用胰酶吹细胞可以脱落下来再终止。离心去上清后再用pbs洗一遍,再铺回新的皿里,这个密度太稀了,把所有细胞都收集到一个6cm或T25养,这样长得比较快。

首次传代建议1:2传代,1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿,不能因为离心后看沉淀觉得细胞还挺多的就1传3,这样容易导致细胞密度稀,长得慢

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