A2780细胞传代背景出现了黑点，贴壁细胞减少，怎么处理?
A2780细胞传代背景出现了黑点图1
A2780细胞传代背景出现了黑点图2
昨天给A2780细胞传代(我传代比例是1;3，离心后看沉淀觉得细胞还挺多的)，今天发现A2780贴壁细胞减少，且背景出现了黑点，要怎么处理?以下是我A2780细胞传代步骤。
1.吸去细胞培养液，加入1mL胰酶
2.显微观察细胞边缘开始发亮皱缩，轻轻敲击瓶底有细胞开始飘落则将细胞拿至超净台，加入2ml完全培养基，把瓶底细胞吹下并吹匀细胞加入离心管中
3.800转3分钟离心细胞
4.吸去上清液，加入完全培养基吹匀细胞，将细胞转移至培养瓶中
【参考建议】
【背景有黑点原因分析
根据他说的有的消化下来也出现黑点，大概率是细胞没消化好就终止，吹打过猛，以至于出现细胞碎片
【处理方式】
下次处理可以多消化一会，直到轻轻用胰酶吹细胞可以脱落下来再终止。离心去上清后再用pbs洗一遍，再铺回新的皿里，这个密度太稀了，把所有细胞都收集到一个6cm或T25养，这样长得比较快。
首次传代建议1：2传代，1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿，不能因为离心后看沉淀觉得细胞还挺多的就1传3，这样容易导致细胞密度稀，长得慢
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