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SH-SY5Y细胞收货出现皱缩、聚团、脱落怎么处理?

时间:2022-03-09 17:19:38 点击:520次

您好,问下SH-SY5Y细胞收货出现皱缩、聚团、脱落该怎么处理好?

【参考方法】

SH-SY5Y细胞收货出现皱缩

常温细胞收货后,把细胞放进培养箱静置2-4小时即可。

如果4小时后细胞仍然没有铺展开,密度适中的前提下可以放培养箱中静置过夜(过夜前倒出部分培养基,留5-10mL在瓶中,瓶盖拧松)。

SH-SY5Y细胞收货时出现聚团

常温细胞收货后,先把细胞放进培养箱静置2-4小时以稳定状态,再进行传代。

传代用含EDTA的0.25%胰蛋白酶消化1-3min左右。

SH-SY5Y细胞收货时出现脱落

常温细胞收货后,先把细胞放进培养箱静置2-4小时以稳定状态再处理。

脱落后的细胞通常聚团漂浮,通过离心将漂浮的细胞团收集起来,在离心管里进行胰酶消化后重新铺板即可。

贴壁细胞常规方法消化下来,和处理好的脱落细胞合并,混匀后铺板。

收货脱落处理

1.1200rpm(约250g)3min离心收集SH-SY5Y细胞,去除旧培养基;

2.PBS 重悬SH-SY5Y细胞,再次 1200rpm(约250g)3min离心,去除PBS;

3.加入 1mL 左右 0.25%胰酶重悬细胞,吹打1-2下吹起沉淀即可;

4.放入培养箱约 1-3min;

5.用移液枪轻轻吹打细胞悬液,使SH-SY5Y细胞团分散;

6.迅速加入 3-5mL 含血清的培养基混匀以终止消化;

7.1200rpm(约250g)3min离心,去除胰酶;

8.加入新鲜培养基按合适比例接入无菌培养器皿中。


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