【成团原因分析】
SH-SY5Y细胞非常敏感,在受到温度、化学或物理刺激后容易出现成团现象,一般来说,SH-SY5Y细胞有少量成团现象,无需特殊处理。成团严重,几乎没有铺展开的细胞并且培养数天未展开时,可以参考以下方法处理。
【处理方法参考】
方法一: 低密度接种,用胰蛋白酶消化细胞(不超过5min),按1:6比例传代接种,并换新的培养器皿。延长换液时间,3天换液一次,防止细胞脱落。
方法二: 使用多聚赖氨酸包被的培养器皿,以加快细胞贴壁速度,降低细胞聚集成团的几率。
方法三: 重新铺板,并更换新配制的培养基,并加大血清比例(不超过20%)。
方法四:接种时,减少培养基量(如T25加3mL)以加快细胞贴壁速度,等待细胞贴壁后(约8-12小时),再补加培养基。
【预防成团方法】
控制细胞密度不超过80%,当密度到达或超过80%及时传代;传代时切勿暴力吹打,避免对细胞造成机械刺激。
使用质量好的培养基和胎牛血清,减少内毒素等有害物质对细胞的刺激。
请勿频繁把细胞从培养箱拿出,气温低时需开暖气维持细胞房温度;使用PBS、培养基前37度预热,以避免温差对细胞造成刺激。
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