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细胞培养板如何选择

时间:2022-08-10 16:27:02 点击:965次

细胞培养板作为培养细胞的一种常用和重要的工具,依底部形状的不同可分为平底和圆底(U型和V型);培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根据材质的不同有Terasaki板和普通细胞培养板,形状、规格、用途多样,那么如何选择适合的培养板?

细胞培养板的选择

1.细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底(U型和V型)

不同形状的培养板有不同用途。培养细胞,通常是选用平底的,这样便于镜下观测、有明确的底面积、细胞培养液面高度相对一致。因此做MTT等实验时,无论是贴壁和悬浮细胞,一般选用平底板。测吸光值一定要使用平底的培养板。要特别注意材质, 标示“Tissue Culture (TC) Treated”是养细胞用的。

U型或V型板,一般在某些特殊要求时才使用。如在免疫学方面,当做两种不同淋巴细胞混合培养时,需要二者相互接触刺激,这时一般会选用U型板,因为细胞会由于重力的作用而聚集在很小的范围内内。圆底培养板还会用于同位素掺入的实验,需要用细胞收集仪收集细胞的培养,如“混合淋巴细胞培养”等。V型板常用做细胞杀伤、免疫学血凝集实验。细胞杀伤这种实验也可用U型板替代(加入细胞后,低速离心)。

2.培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536 孔等

大多数用户在组织培养瓶上开始组织培养。不过,许多应用也需要多孔板。理想的数量嘛,取决于你所需的通量水平,以及是否有机器人的协助。完全手动地向96孔板中添加试剂,这并非不可行,但有电动移液器或机器人的帮助当然更好。扩展到384孔板,就更加需要机器人,而1536孔板更是绝对需要。当然,高密度多孔板的挑战还在于分析小型化。

3. 微孔板的颜色

多孔板的颜色也与应用息息相关。如果用相差显微镜或肉眼观察细胞,可选择透明的多孔板。不过,对于可见光光谱以外的应用(如冷光或荧光),有颜色的多孔板(如白色或黑色)则是必需的。在使用从顶部读数的仪器时,底部应该是不透明的,而使用显微镜或底部读数的仪器时,应选择底部透明的多孔板。冷光样品通常选择白色表面,以便最大限度提高信号的反射率,而大于300 nm的荧光应用通常使用黑色表面,以吸收激发信号。有颜色的表面还可以防止相邻孔之间的信号串扰。

4. 表面处理

选择哪种细胞表面处理,这要取决于你培养的是悬浮细胞还是贴壁细胞。对于悬浮或球体细胞培养,建议使用BRAND inertGrade™微孔板,它经过专利的疏水凝胶处理,可抑制细胞或蛋白附着。对于轻松附着的贴壁细胞(如HeLa),标准的组织培养表面就足够了。对于那些贴壁有困难的细胞(如原代细胞),或涉及到严格洗涤的应用,建议使用BRAND的cellGrade™微孔板。这种独特的表面与多聚赖氨酸处理的表面相似,但它不是涂层,而是塑料性质的物理变化,因此不需要冷藏。对于那些敏感细胞或血清量减少的细胞,建议使用cellGrade™ plus表面。

5.根据材质的不同有Terasaki板和普通细胞培养板

Terasaki plate主要是用于晶体学研究,产品设计便于对晶体的观察与结构分析。有两种sitting 和handing drop两种方法,两种方法应用产品的外形结构也不同。材料上选择crystal class polymer ,特殊的材料有利观察晶体结构。细胞培养板主要是PS材料,材料是treated sufface,便于细胞贴壁生长与伸展。当然还有浮游细胞的生长材料,同时还有low binding surface。

具体选择时根据培养细胞的类型、所需培养体积及不同的实验目的而定。

平底和圆底(U型和V型)培养板的区别和选择

1.贴壁细胞一般用平底培养板。

2.悬浮型细胞的培养一般用V型。

3.U型培养板亦多用于培养悬浮型细胞 。

4.V型培养板有时用做免疫学血凝集的实验。

细胞培养板与酶标板的区别

酶标板一般要比细胞培养板贵,细胞板主要做细胞培养,也可以用来测蛋白浓度;酶标板包括包被板和反应板,一般不用做细胞培养,它主要做免疫酶联反应后的蛋白检测,需要更高的要求和特定的酶标工作液。常用不同培养板的孔底面积及推荐加液量不同孔板所加培养液的液面都不宜太深,一般在2~3mm范围,结合不同孔的底面积就可算出各培养孔的适宜加液量(参考下表)。若加液量过多会影响气体(氧气)交换,而且在搬动过程中易溢出造成污染。具体所加细胞密度依实验的目的不同灵活掌握。

不同型状的板子自然有不同用途

平底的什么类型的细胞都可用,但当细胞数目较少,如做克隆时,就用96孔平底板。

另外﹐做MTT等实验时,无论贴壁和悬浮细胞,一般均用平底板。

细胞培养板问题集锦

问题1:我看到培养板有4、6、12、24、48、96孔几种规格 ,但不知道到底什么实验用哪种规格?

答:要根据你具体的实验要求,流式一般用6孔,MTT一般用96孔,细胞爬片一般用24孔等!要具体根据你实验来定。

问题2:请问Terasaki板与普通细胞培养板有什么区别?

答:Terasaki plate主要是用于晶体学研究,产品设计便于对晶体的观察与结构分析。

有两种sitting 和handing drop两种方法,两种方法应用产品的外形结构也不同。

材料上选择crystal class polymer ,特殊的材料有利观察晶体结构。

细胞培养板主要是PS材料。材料是treated sufface。便于细胞贴壁生长与伸展。当然还有浮游细胞的生长材料,同时还有low binding surface,有关更多实验材料上的应用与对材料的选择。

问题3:我想测吸光度用酶标仪,用多孔细胞培养板行吗?请问酶标板多孔细胞培养板有什么区别?

答:用多空细胞培养板测吸光度肯定可以拉,我们经常用它来做样品的蛋白定量和MTT检测。

区别:酶标板一般要比细胞培养板贵,细胞板主要做细胞培养,但也可以用来测蛋白浓度;酶标板包括包被板和反应板,一般不能用做细胞培养,它主要做免疫酶联反应后的蛋白检测,它需要更高的要求还需要特定的酶标工作液。

以上就是关于细胞培养板的选择内容,各位科研老师选择时根据培养细胞的类型、所需培养体积及不同的实验目的而定。

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