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各种培养瓶、培养皿规格及加液量

时间:2022-11-15 15:44:07 点击:27758次

细胞培养(cell culture)是指在体外模拟体内环境,使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。在培养细胞时需要用到各种细胞培养耗材,如培养器皿、培养瓶或者多孔培养板来培养细胞,那么不同规格的培养瓶、培养皿、多孔培养板需要加多少培养基及可获细胞量是多少呢?

培养器皿主要有培养瓶、培养皿、多孔培养板这三种。

各种培养瓶、培养皿规格及加液量

细胞培养皿

培养皿是一种用于微生物或细胞培养的实验室器皿,由一个平面圆盘状的底和一个盖组成,一般用玻璃或塑料制成。培养皿材质基本上分为两类,主要为塑料和玻璃的,玻璃的可以用于植物材料、微生物培养和动物细胞的贴壁培养也可能用到。塑料的可能是聚乙烯材料的,有一次性的和多次使用的,适合实验室接种、划线、分离细菌的操作,可以用于植物材料的培养。

它最初由在德国生物学家罗伯特·科赫手下工作的细菌学家朱利斯·理查德·佩特里(Julius Richard Petri,1852-1921)于1887年设计,故又称为“佩特里皿”。培养皿质地脆弱、易碎,故在清洗及拿放时应小心谨慎、轻拿轻放。使用完毕的培养皿最好及时清洗干净,存放在安全、固定的位置,防止损坏、摔坏。

常见的玻璃或塑料培养皿,可以用于装取、分离、处理组织,也可以用于细菌毒性、单细胞分离、同位素掺入实验。常见规格为10cm、9cm、6cm、3.5cm等。

细胞培养皿规格及加液量

产品规格高度生长面积建议上液量
35mm10mm8cm23ml
60mm15mm21cm25ml
100mm20mm55cm210ml
150mm25mm148cm230ml
245mm(方形)25mm500cm2100ml

细胞培养瓶

常见的为玻璃培养瓶,用于培养及繁殖细胞。国产的规格以容量(ml)标识,进口的则以底面积(c㎡)表示。

细胞培养瓶常见的规格:培养面积25cm²(容量50ml)、培养面积75cm²(容量250ml)、培养面积175cm²(容量600ml)、其他还有12.5cm2,25ml;300cm2,850ml等。

细胞培养瓶根据材质可以分为玻璃的和塑料的,底部形状有正方形、长方形、三角形等,根据瓶子容积有5至500ml供选择。另外,表面经过特殊改性处理后,可以让细胞更好的进行贴壁培养,这样根据细胞贴壁面积又可以分为25~175cm2多种。

培养瓶的瓶颈也有多种样式,有直颈、斜颈、角度颈、三角形、矩形。

1)直颈:可以减少培养基因晃动而流到瓶盖里;

2)斜颈:易于倾注,移液管或者细胞刮容易进入瓶体;

3)角度颈:移液管或者细胞刮易于进入瓶身,并且可减少培养基因晃动而流到瓶盖;

4)三角形:移液管或细胞刮更易达到瓶角,宽底增加稳定性;

5)矩形:斜颈的矩形培养瓶瓶底至瓶颈是一个坡度设计,易于倾注,移液管或者细胞刮容易进入瓶体,大部分斜颈瓶都有一个裙边以增加稳定性。直颈和角度颈的矩形培养瓶整个瓶底都是培养面,节省空间并减少培养基因晃动而流到瓶盖。

细胞培养瓶规格及加液量

规格建议上液量
25cm2,矩形,斜颈,透气盖5ml
75cm2,矩形,斜颈,透气盖15ml
150cm2,矩形,斜颈,透气盖30ml
175cm2,矩形,角度颈,透气盖35ml
225cm2,矩形,斜颈,透气盖45ml

细胞培养板

细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底(U型和V型);培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536 孔等。

根据材质的不同的不同有Terasaki板和普通细胞培养板。具体选择时根据培养细胞的类型、所需培养体积及不同的实验目的而定。

细胞培养板规格及加液量

规格单孔面积体积建议上液量
6孔板9.5cm216.5ml2.5-3.0ml
12孔板3.9cm26.5ml2.0ml
24孔板1.75cm22.9ml1.0ml
48孔板1.0cm21.7ml0.5ml
96孔板0.32cm20.37ml(平底)


0.1-0.25ml


96孔板0.35cm20.30ml(U-底)
96孔板0.28cm20.23ml(V-底)
384孔板0.1cm20.12ml0.06ml
1536孔板0.02cm20.012ml0.015ml
4孔板16.0cm2132x825.0ml
8孔板8.6cm2132x823.0ml
4孔板21.8cm2128x865.0ml

细胞培养板规格及加液量

培养器皿底面积(cm2加培养液量(ml)可获细胞量
96孔培养板0.320.1105
24孔培养板21.05x105
12孔培养板4.52.0106
6孔培养板9.62.52.5x106
4孔培养板285.07x106
3.5cm培养皿83.02.0x106
6cm培养皿215.05.2x106
9cm培养皿4910.012.2x106
10cm培养皿5510.013.7x106
25cm塑料培养瓶255.05x106
75cm塑料培养瓶7515-302x107
25cm玻璃培养瓶194.03x106
100cm玻璃培养瓶37.510.06x106
250cm玻璃培养瓶7815.02x107
2500cm旋转培养瓶700100-2502.5x108

24孔板: PLL 100-200μl (200μI)(即可,铺板2h后,吸出PLL (回收)),PBS冲洗2次,晾干备用或不晾干直接用。加培养液量1ml,注意调整细胞密度。

25cm2(5m)→(1:2) 50cm2(10ml)一(1:3)75cm2(15ml)

2cm2 (1ml) →1/25—1/40 总细胞悬液

96孔板:PLL20-40μl(40μl)即可,铺板2h后,吸出PLL(回收),PBS冲洗2次,晾干备用或不晾干直按用。加培养液量0.1ml-0.2ml,注意调整细胞密度。

25cm2 (5ml)→(1:2) 50cm2 (10ml)一(1:3) 75cm2 (15ml)

0.32cm2 (0.1-0.2ml) →1/150— 1 /250总细胞悬液

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