在细胞体外培养过程中,培养瓶、培养板和培养皿除了具有良好的透明度和无毒、无菌外,还需经表面改性处理使之能够贴壁、分裂和生长。细胞和组织的体外培养已成为生命研究和实践的内容。培养的细胞类型繁多,从病毒到细菌和真菌,从人体细胞到动物细胞和植物细胞。细胞培养必须借助细胞耗材方能达到细胞生长所需的条件,细胞培养瓶和培养皿是常见的两大类,那么这两种耗材有什么区别,如何选择呢?
细胞培养瓶与培养皿介绍
细胞培养瓶
细胞培养瓶是实验室进行长时间细胞培养、大量细胞扩增和防污染的最适培养器皿。 细胞培养瓶可方便、安全地处理细胞,确保实验流程安全进行。
细胞培养瓶有四种规格:25cm2、75cm2、175cm2、225cm2,提供 TC 处理和未TC处理两种表面。 根据材质可以分为玻璃的和塑料的,底部形状有正方形、长方形、三角形等,根据瓶子容积有5至500ml供选择。另外,表面经过特殊改性处理后,可以让细胞更好的进行贴壁培养,这样根据细胞贴壁面积又可以分为25~175cm2多种。
细胞培养瓶的盖子主要有透气盖和密封盖两种。根据细胞的对氧气的需求程度来选择即可。根据形状的不同,可分为方瓶、转瓶、三角形、斜颈瓶等,每种瓶子各有特点,对应不同的细胞培养需求。从细胞对产品的贴壁要求来看,又分为普通型、标准型和专用型三类,如专用型表面含有含氮官能团,能促进某些特殊细胞(如肿瘤细胞)的贴壁、生长和分化。值得注意的是,贴壁细胞培养需要对培养瓶进行TC表面处理,以适应细胞的贴壁生长。
细胞培养瓶的瓶盖分为密封盖和滤膜盖。密封盖常用于密闭培养,旋松瓶盖时也可用于开放培养。滤膜盖适用于开放培养,盖内装有0.2um的疏水滤膜,避免了气体交换过程中可能产生的交叉感染,一般推荐用于二氧化碳培养箱培养,特别是需要长期培养的实验。
细胞培养瓶的这些特点都是基于目前细胞培养工作的需求而来,这些需求点将根据技术的进步而不断变化,细胞培养瓶也将在此基础上进行更新迭代。
细胞培养皿
细胞培养皿根据底面积大小可分为35mm,60mm,175mm,200m,225mm等规格。细胞培养皿的主要作用是进行简单的细胞培养,适合小型的实验,或样本培养。
培养皿为什么要倒置培养
1)由于重力的作用使培养基表面及次层能富集微生物生长所需的营养物质,利于微生物生长;
2)防止空气中微生物的污染培养基及培养物:倒置时平板内的空气是不流动的,杂菌不会沉降到培养基表面,如果不倒置,很快平板周边会长起杂菌。
3)倒置培养使琼脂里水分不易蒸发出去,而充分的保持琼脂的弹性与细菌容易繁殖和生存的环境。如果不倒置,大概3天左右培养基就会出现龟裂等水分散失的情况。 而一些落菌等试验,需验证培养基无菌,就要先倒置培养48小时才可作为模板做落菌,水分散失是很重要的。
培养皿处理提示
1.购买后,请务必确认标签上的注意事项。
2.做好预防颠倒,摔坏的措施和管理体制。
3.在使用前再次确认标签上的注意事项。做好必要的安全对策。
4.对没有标明其危险特性,有害特性的,也要慎重地进行操作。
5.必须戴好防护用具,小心翼翼进行操作。
6.请参照相关法规,文献,MSDS等信息,理解并掌握好试剂的特性,再进行安全操作。
7.通常购买试剂时要想到一次性用完。若估算不足有剩余的话,要更加注意其保管和管理。
8.万一试剂操作者并非专业技术人员。必须在专业人士的指导监督下进行操作。
9.对于使用后的废弃物,不要或旧的试剂,应按照相关法律法规正当处理。
细胞培养瓶和培养皿如何选择
培养皿和培养瓶都是实验室里面用于微生物或细胞培养的容器,培养皿与培养瓶的区别是什么呢?
细胞培养瓶:适合长期培养、传代、作为种子细胞,瓶口较小,细胞不易被污染。
细胞培养皿:适合在各种实验中选用,临时培养。二者的区别在于安全系数的高低和培养细胞数量的多少。以细胞为载体或者对象的实验用培养皿比较好,因为用的量比较少,节约细胞,而且培养皿比较方便做对照实验,但是培养皿开口较大,相对更容易污染,所以操作时更要小心。
组织块原代培养或容易被污染的细胞培养时用培养瓶,长出的细胞传代后就可以依个人喜好而定,细胞培养瓶的面积较大,所以需要大量扩增细胞的时候可以用培养瓶。
细胞培养瓶和培养皿都是实验室里面用于微生物或细胞培养的容器,具体选用哪种耗材要根据实验的具体需求而定,还要考虑到细胞的培养方式,是悬浮培养还是贴壁培养,合适的耗材是实验成功的基础。
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