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人Ⅱ型肺泡上皮细胞

人Ⅱ型肺泡上皮细胞

Type II Alveolar Epithelial Cells

货号:IMP-H038 规格:5×105cells/T25

规格:5x105cells/T25或1mL冻存管 形态:上皮样,多角形细胞,贴壁生长

培养基:人Ⅱ型肺泡上皮细胞专用培养基

传代比例:首次传代建议1:2传代,1:2传代是1个T25瓶传2个T25瓶或2个6cm皿

价格:8620元

搭配培养体系
一、细胞基本属性
细胞名称人Ⅱ型肺泡上皮细胞
种属来源
组织来源肺组织
生长特性贴壁生长
形态特征上皮样,多角形细胞
质量检测
肺表面活性蛋白 A(SP-A)或肺表面活性蛋白 C(SP-C)免疫荧光染色为阳性,纯度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等
产品规格5x105cells/T25或1mL冻存管
培养基人Ⅱ型肺泡上皮细胞专用培养基
培养条件气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
换液频率每2-3天换液一次
消化液0.25%胰蛋白酶
产品货期7-8周左右
运输方式T25培养瓶/顺丰快递(包邮)
供应限制仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
背景介绍
人Ⅱ型肺泡上皮细胞采用弹性蛋白酶消化法制备而来制备而来,人Ⅱ型肺泡上皮细胞分离自肺组织;肺泡由单层上皮细胞构成的半球状囊泡。肺中的支气管经多次反复分枝成无数细支气管,它们的末端膨大成囊,囊的四周有很多突出的小囊泡,即为肺泡。小肺泡细胞,又称I型肺泡细胞,厚约0.1微米,基底部是基底膜,无增殖能力。大肺泡细胞,又称Ⅱ型肺泡细胞,分泌表面活性物质(二棕榈酰卵磷脂),以降低肺泡表面张力。Ⅱ型肺泡细胞位于Ⅰ型肺泡细胞之间,数量较Ⅰ型肺泡细胞多,但覆盖面积比Ⅰ型肺泡细胞小。细胞立方形或圆形,顶端突入肺泡腔。细胞核圆形,胞质着色浅、呈泡沫状。电镜下,细胞游离而有少量微绒毛,胞质内富含线粒体和溶酶体,有较发达的粗面内质网和高尔基复合体。核上方有较多的分泌颗粒,电子密度高、大小不等,直径约0.1-1.0μm颗粒内含有平行排列的板层状结构,称为嗜饿性板层小体。小体内的主要成分为磷脂,以二棕榈酰卵磷脂为主,此外还有糖胺多糖及蛋白质等。颗粒内物质释放出来后,在肺泡表面形成一层粘液层,称为表面活性物质(surfactant)。表面活性物质有降低肺泡表面张力、稳定肺泡大小的作用。呼气时肺泡缩小,表面活性物质密度增加,表面张力降低,防止肺泡过度塌陷;吸气时肺泡扩张,表面活性物质密度减小,肺泡回缩力加大,可防止肺泡过度膨胀。表面活性物质的缺乏或变性均可引起肺不张,过度通气可造成表面活性物质缺乏;吸入毒气可直接破坏表面活性物质。Ⅱ型肺泡细胞有分裂、增殖并分化为Ⅰ型肺泡细胞的潜能,故具有修复受损伤上皮的作用。Ⅱ型肺泡细胞(ATⅡ)又称颗粒肺泡细胞,散在分布于ATⅠ肺泡细胞(ATⅠ)之间及其相邻的肺泡间隔结合处。其体积较小,呈立方形,表面稍突向肺泡腔。细胞核大而圆,胞质染色较浅淡,胞质中常见空泡。数量较ATⅠ多,ATⅡ占肺泡上皮细胞总数的14%到16%,但仅覆盖5℅的肺泡表面。ATⅡ体积比ATⅠ小很多,人约为900um3 .在细胞游离面有较多的短微绒毛,尤其在细胞边缘部更多。细胞表面有 MPA凝集素,对α-半乳糖残基有特异性反应。相邻细胞以紧密连接或中间连接相连,胞质内有较多的线粒体和粗面内质网,还有多泡体、溶酶体和板层体[1]。ATⅡ是肺泡上皮细胞的“干细胞”,它的功能多样:能增殖成新的ATⅡ,还可以分化为其他上细胞如ATⅠ;合成和分泌表面活性物质的功能;肺水转运功能;强大的免疫功能。这些功能与以下疾病有密不可分的关系。
二、细胞培养操作
收货处理取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态
传代密度细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养
传代代数可传1-2代左右,建议收到细胞后尽快进行相关实验
传代比例首次传代建议1:2传代,细胞系密度达80%-90%,即可进行传代培养操作,货期4周左右
传代方法
1.吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2.添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3.用吸管轻轻吹打混匀,按1:2比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4.待细胞完全贴壁后,培养观察;之后每2-3天换液一次新鲜的完全培养基。
备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考
客户在细胞培养过程中,有任何技术问题可以拨打技术服务电话:400-080-3389 按 2,我们随时给予解答。
三、注意事项
重要提醒
1.培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2.在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3.传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4.运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。
到货须知
1.收到细胞后,首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发,细胞是否解冻,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2.静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照(当天以及第 2,3 天请拍照),记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
3.由于运输的原因,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
4.仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。
四、售后服务
重发标准
1.细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发;
2.收到细胞未开封,如出现污染状况,重发;
3.收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发;
4.常温发货的细胞静置 2 小时后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发;
5.常温发货的细胞静置 22 小时并且未开封,出现污染,经核实后,重发;
6.细胞活性问题,请在收到产品 3 天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发;
7.视具体情况而定。
不予重发
1.客户操作造成细胞污染,不重发;
2.客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发;
3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;
4.细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前 3 天的细胞状态照片,不重发;
5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发;
6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发;
7.视具体情况而定。

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