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KLE人子宫内膜癌细胞(STR鉴定正确)
KLE细胞图片
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KLE人子宫内膜癌细胞(STR鉴定正确)

货号:IM-H501 来源:ATCC

规格:1×106cells/T25或1mL冻存管 形态:上皮细胞样,贴壁生长

培养基:DMEM/F12+10% FBS+1%PS

传代方法:1:2至1:3,每周 2-3次

价格:1500元

搭配培养体系
  一、细胞基本属性
细胞名称KLE 人子宫内膜癌细胞(STR鉴定正确)
细胞别称KLE ;人子宫内膜癌细胞
种属来源
年龄性别64岁,女
组织来源子宫
生长特性贴壁生长
细胞形态上皮细胞样
细胞代数10代以内 
背景简介KLE细胞是源自一名64岁白人女性的子宫内膜肿瘤组织,由G·R·Richardson于1984年建系。KLE细胞染色体为非整倍体,数目范围在51-66之间。KLE细胞裸鼠植瘤后,其肿瘤标本在电镜下显示,细胞间见紧密相连,细胞表面具有微绒毛。KLE细胞形态特征与孕激素刺激后的子宫内膜相似。
生物安全等级1
细胞规格1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测
保藏机构ATCC; CRL-1622 BCRJ; 0365
培养基DMEM/F12+10% FBS+1%PS
培养条件气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件无血清冻存液,液氮储存
倍增时间~114 hours
致瘤性 Yes, Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells.
抗原表达情况Blood Type O; Rh+
细胞货期现货,1周左右
发货方式复苏发货(免运输费用)/  冻存发货(需加干冰运输费用) 顺丰快递
供应限制仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
特别说明以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主
  二、细胞培养操作
收货方式T25瓶冻存管
初步平衡用75%酒精擦拭细胞瓶表面,放37度培养箱内静置培养2-4h,以便稳定细胞状态无须平衡,直接放入-80冰箱(不超过一周)或者液氮罐保存,建议尽早复苏
传代密度细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养第三天换液并检查细胞密度
传代比例     首次传代建议1:2传代,1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿一管细胞建议接种到6cm培养皿或者T25瓶
传代方法
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 -3min(视细胞消化情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL完全培养基,培养过夜)。第三天换液并检查细胞密度。
注意事项
 1.运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 
2.因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。          
1.收货时若发现干冰化完,检查冻存管是否融化,若已融化需直接离心细胞接种观察,若未融化可以将细胞按正常步骤保存;        
2.为保证细胞的高存活率,收到产品后,请立即解冻复苏细胞。
到货须知
1.收到细胞后,及时拍照记录有无漏液、浑浊或瓶身破损现象。          
2.静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照(当天以及第 2,3 天请拍照),记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
3.由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。          
 4.  仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。          
备注:客户在细胞培养过程中,有任何技术问题可以拨打技术服务电话:400-080-3389 按 2,我们随时给予解答。
  三、细胞冻存操作
冻存液配方无血清冻存液,液氮储存
细胞密度待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例
冻存方法
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
注意事项冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案
  四、售后服务
重发标准
1.细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发;
2.收到细胞未开封,如出现污染状况,重发;
3.收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发;
4.常温发货的细胞静置 2 小时后,干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发;
5.常温发货的细胞静置 22 小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后,出现污染,经核实后,重发;
6.细胞活性问题,请在收到产品 3 天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发;
7.视具体情况而定。
不予重发
1.客户操作造成细胞污染,不重发;
2.客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发;
3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;
4.细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前 3 天的细胞状态照片,不重发;
5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发;
6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发;
7.视具体情况而定。

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