逸漠生物构建可靠的细胞资源平台。涵盖细胞系、原代细胞、标记细胞、耐药细胞及培养相关产品
细胞资源平台
咨询热线:400-080-3389
您的位置: 首页>>细胞培养视频
细胞培养视频

第四节:人脐带间充质干细胞的制备

时间:2023-04-25 15:49:25 点击:402次

实验前准备

提前开启紫外线照射超净台30min。

将培养基和添加剂室温融化,使用前室温中预温10-30min。

紫外照射完毕后,75%酒精消毒超净台,超净台通风10min以上。

完全培养基的配制

添加剂按1:100比例加入基础培养基中,轻柔摇匀培养基后备用。

脐带MSC制备

(1)采集健康足月新生儿脐带。

(2)75%酒精消毒脐带储运瓶,在超净台中取出脐带,酒精浸泡1min,用生理盐水清洗(将淤血清洗干净),将脐带剪短至2-3cm。

(3)小心地将静脉血管和动脉血管剖离,撕取华通胶。

(4)华通胶置于加少量生理盐水的50ml离心管中(华通胶不少于8ml),剪碎至1立方厘米大小。

(5)300g,8min离心,取上清做菌检。

(6)生理盐水清洗2-3遍,300g,8min离心。

(7)用10ml移液管将华通胶块平分到150cm2的培养皿中(根据华通氏胶的量确定培养皿的个数),加入15ml的完全培养基。

(8)在培养瓶上标记相关信息,包括样本编码、操作项目、操作时间、操作人等。

(9)小心将培养瓶放入37℃、5%CO2培养箱中,培养最初5-7天,保持培养瓶绝对静止。

(10)根据细胞生长情况,每隔3天进行一次半量换液或全量换液。

(11)D13-D14收获细胞。

(12)不同培养器皿的组织块植入量及培养基添加量见下表:


不同培养器皿的组织块植入量及培养基添加量
热门产品推荐

大家都在看

版权说明:本文:“第四节:人脐带间充质干细胞的制备:http://www.immocell.com/xbpyvideo/4295.html”,若本站收录的信息如有侵权,请给我们来信(im@immocell.com),我们将及时处理。