细胞介绍
细胞名称:人子宫内膜间质细胞(iehESCs)
货号:IMP-H133
传代方法:汇合度达到85%以上
传代比例:1:2至1:3,每周 3 次
组织来源:人
形态特性:成纤维细胞样生长特性:贴壁生长
专用培养基:IMP-H133-1
培养条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
人子宫内膜间质细胞采用胶原酶消化结合差速贴壁法制备而来,人子宫内膜间质细胞分离自子宫组织;子宫是孕育胎儿的器官,位于盆腔中部,膀胱与直肠之间,其位置可随膀胱与直肠的充盈程度或体位而有变化。子宫的正常位置主要依靠子宫诸韧带、盆膈、尿生殖膈及会阴中心腱等结构维持,这些结构受损或松弛时,可以引起子宫脱垂。子宫内膜即黏膜,由上皮(属单层柱状上皮,有分泌细胞和纤毛细胞二种)和固有膜(由结缔组织构成,其内有大量的星形细胞,称为基质细胞)组成,子宫内膜可分为浅表的功能膜和深部的基底层,功能层较厚,约占内膜厚度的4/5;基底层较薄较致密,约占1/5,功能层可剥脱,而基底层不可剥脱。子宫内膜构成雌性哺乳动物子宫壁的最内层,位于子宫腔面,在动物生殖生理活动中占有重要地位。子宫和子宫内膜是维持雌性动物生理功能和生育能力的重要器官,子宫内膜的再生修复是子宫的重要生理功能。体外培养的子宫内膜间质细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。
细胞应用领域
● 建立分离培养符合实验要求的人子宫内膜间质细胞的方法,为研究子宫内膜异位症的分子生物学机制提供实验模型,适用于子宫内膜异位症发病机制和药物筛选等研究。探讨子宫内膜细胞能否直接或间接分泌雌激素及其调节因素。采用体外子宫内膜间质细胞(ESC)培养模型,观察不同激素对ESC分泌雌二醇的影响。ESC能直接或利用睾酮产生雌二醇,且孕酮与睾酮有协同作用;促黄体生成激素(LHRH)、促卵泡激素(FSH)对ESC分泌雌二醇有促进作用。
● 子宫内膜间质细胞分泌雌二醇可能通过旁分泌途径调节子宫的功能;下丘脑-垂体激素能直接作用于子宫内膜细胞调节其生理功能。
● iehESCs可以用来构建子宫内膜异位症的细胞模型,帮助研究者了解疾病的发病机制,并筛选出对疾病有效的药物。
●iehESCs在组织工程中可以用于损伤子宫内膜的修复和再生。
● 利用基因编辑技术(如CRISPR/Cas9)对iehESCs进行基因编辑,可以研究特定基因在子宫内膜中的功能,并为遗传病治疗提供可能。例如,研究者可以通过基因编辑技术纠正iehESCs中的致病基因,为某些遗传性妇科疾病的治疗提供新的思路。细胞标志物:人子宫内膜间质细胞(iehESCs)的标志物包括Cytokeratin、Nestin、Integrins、CAMs、Fibrinogen、PAI-1、Laminin、Collagen IV、TF和PR等。这些标志物对于识别和研究iehESCs至关重要。
培养注意事项
● T25细胞培养瓶中的培养基被吸出,并用PBS清洗细胞一次。
● 向培养瓶中加入约1 mL的0.25%胰蛋白酶消化液,置于37℃温水浴中消化1-2 min(视细胞情况而定)。
● 在倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸掉消化液。
● 加入适量的完全培养液终止消化。
● 使用吸管轻轻吹打混匀,根据1:2-1:3的比例进行接种传代。● 补充新鲜的完全培养基至5 mL。
● 将细胞培养瓶置于37℃、5% CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
● 待细胞完全贴壁后,进行培养观察。
● 每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
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