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人胆囊上皮细胞(永生化)
人胆囊上皮细胞永生化图片
人胆囊上皮细胞永生化图片
人胆囊上皮细胞永生化图片
人胆囊上皮细胞永生化图片

人胆囊上皮细胞(永生化)

货号:IM-H347

规格:1×106cells/T25或1mL冻存管 形态:上皮样,多角形细胞,贴壁生长

培养基:人胆囊上皮细胞完全培养基

传代比例:1:2至1:3,每周 3次

培养环境:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃

价格:2500元

搭配培养体系
一、细胞基本属性
细胞名称人胆囊上皮细胞(永生化)
组织来源胆囊组织
生长特性贴壁生长
细胞形态上皮样,多角形细胞
背景简介

胆囊,是位于右方肋骨下肝脏后方的梨形囊袋构造,有浓缩和储存胆汁之作用。胆囊壁由粘膜、肌层和外膜三层组成。

胆囊内面以粘膜覆盖,有发达的皱襞。胆囊收缩排空时,皱襞高大而分支;胆囊充盈时,皱襞减少变矮。粘膜上皮为单层柱状,内分散分部着少量杯状细胞。胆囊粘膜细胞具有典型的吸收型细胞的特征,具有较强的吸收和浓缩功能,上皮细胞吸收胆汁中的水和无机盐,经细胞侧面的质膜转运至上皮细胞间隙内,吸收的水和无机盐通过基膜进入固有层的血管和淋巴管内。同时,胆囊粘膜亦有分泌功能,分泌粘液。

该细胞通过慢病毒转染的方式携带SV40基因。

细胞代数10代以内
细胞规格1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
培养基人胆囊上皮细胞完全培养基
培养条件气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件无血清冻存液,液氮储存
细胞纯度经鉴定细胞纯度高于90        
细胞鉴定S100免疫荧光染色为阳性
细胞货期2周左右
运输方式复苏发货(T25瓶免运输费用)/冻存发货(需加干冰运输费用) 顺丰快递
供应限制仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
特别说明以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主
  二、细胞培养操作
收货方式T25瓶冻存管
收货处理观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁,将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h,以便稳定细胞状态收到细胞后,需立即转入液氮冻存或直接复苏
传代密度细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养第二天换液并检查细胞密度
传代比例首次传代建议1:2传代
1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶
传代方法a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。        
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。        
c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10 cm皿中,加入约8 mL培养基,培养过夜)。第三天换液并检查细胞密度。
  三、细胞冻存操作
冻存液配方无血清冻存液,液氮储存
细胞密度待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例
冻存方法a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,加 1 mL血清重悬细胞,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5x106~1x107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
注意事项冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案
  四、售后服务
重发标准
1.细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发;
2.收到细胞未开封,如出现污染状况,重发;
3.收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发;
4.常温发货的细胞静置 2 小时后,干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发;
5.常温发货的细胞静置 22 小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后,出现污染,经核实后,重发;
6.细胞活性问题,请在收到产品 3 天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发;
7.视具体情况而定。
不予重发
1.客户操作造成细胞污染,不重发;
2.客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发;
3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;
4.细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前 3 天的细胞状态照片,不重发;
5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发;
6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发;
7.视具体情况而定。

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培养指南

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