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RWPE-2人前列腺正常细胞(STR鉴定正确)
RwPE-2人前列腺正常细胞图片
RwPE-2细胞图片
RwPE-2人前列腺正常细胞图片
RwPE-2细胞图片

RWPE-2人前列腺正常细胞(STR鉴定正确)

Human Prostate Normal Cells

货号:IM-H320 来源:ATCC

规格:1×106cells/T25或1mL冻存管 形态:上皮细胞样,贴壁生长

培养基:K-SFM+0.05 mg/ml BPE +5 ng/ml EGF+ PS

传代方法:1:2至1:3,每周2-3次

价格:2500元

搭配培养体系
  一、细胞基本属性
细胞名称RWPE-2人前列腺正常细胞(STR鉴定正确)
细胞别称RWPE-2;人前列腺正常细胞
种属来源
年龄性别男,54岁
组织来源前列腺正常细胞
生长特性贴壁生长
细胞形态上皮细胞样
特别注意RWPE-2细胞消化时需要用带10%血清的培养基来终止
细胞代数10代以内 
背景简介RWPE-2细胞是由Webber·M·M于1996年建株,该细胞来源于54岁白人男性。源于正常成人前列腺周边组织的上皮细胞经过转染HPV-18后建系得到该细胞株。在三维基质胶培养时,在雄激素作用下,RWPE-1细胞形成腺胞并向培养基中分泌PSA(kallikrein 3, KLK3)。来源于RWPE-1的细胞再用Kirstin鼠类肿瘤病毒转染Ki-ras基因,建立了能成瘤的RWPE-2细胞株和 RWPE2-W99细胞株。同时,用N-甲醇-N-硝基脲处理RWPE-1,建立了一系列模拟前列腺癌进程中不同时期的成瘤细胞株, 分别是 WPE1-NA22, WPE1-NB14, WPE1-NB11 和 WPE1-NB26 细胞株。 据提供者报道,RWPE-1 细胞株经过检测,乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒都呈阴性
STR鉴定图片RWPE-2人前列腺正常细胞STR鉴定图片
生物安全等级      2
细胞规格1×10 6cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测
保藏机构 ATCC; CRL-11610
培养基K-SFM+0.05 mg/ml BPE +5 ng/ml EGF+ PS
培养条件气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件无血清冻存液,液氮储存
致瘤性Yes, in nude mice. Yes, in soft agar.
受体表达情况androgen receptor, expressed (upregulated upon exposure to androgen)
抗原表达情况kallikrein 3, KLK3 (prostate specific antigen, PSA); Homo sapiens, expressed (upon exposure to androgen)
基因表达情况cytokeratin 18, cytokeratin 8
细胞货期现货,1周左右
运输方式复苏发货(T25瓶免运输费用)/  冻存发货(需加干冰运输费用) 顺丰快递
供应限制仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
特别说明以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主
  二、细胞培养操作
收货方式T25瓶冻存管
收货处理观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁,将T25瓶置于37度培养箱放置2-3h,以便稳定细胞状态收到细胞后,需立即转入液氮冻存或直接复苏
传代密度细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养第三天换液并检查细胞密度
传代比例首次传代建议1:2传代        
  1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶
传代方法a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。        
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,弃去消化液,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min(根据细胞消化程度而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。        
c、按6-8 mL/瓶补加培养基,轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心4 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。        
d、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心5 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL完全培养基,培养过夜)。第三天换液并检查细胞密度。
注意事项
1.运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 
2.因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。
1.收货时若发现干冰化完,检查冻存管是否融化,若已融化需直接离心细胞接种观察,若未融化可以将细胞按正常步骤保存;        
2.为保证细胞的高存活率,收到产品后,请立即解冻复苏细胞。
到货须知
1.收到细胞后,首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发,细胞是否解冻,若有上述现象发生请及时和我们联系。          
2.静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照(当天以及第 2,3 天请拍照),记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
3.由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。          
4.仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。
备注:客户在细胞培养过程中,有任何技术问题可以拨打技术服务电话:400-080-3389 按 2,我们随时给予解答。
  三、细胞冻存操作
冻存液配方无血清冻存液,液氮储存
细胞密度待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例
冻存方法a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,加 1 mL血清重悬细胞,进行细胞计数。        
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5x106~1x107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。        
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
注意事项冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案
  四、售后服务
重发标准
1.细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发;
2.收到细胞未开封,如出现污染状况,重发;
3.收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发;
4.常温发货的细胞静置 2 小时后,干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发;
5.常温发货的细胞静置 22 小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏 2 天后,出现污染,经核实后,重发;
6.细胞活性问题,请在收到产品 3 天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发;
7.视具体情况而定。
不予重发
1.客户操作造成细胞污染,不重发;
2.客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发;
3.非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;
4.细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前 3 天的细胞状态照片,不重发;
5.细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发;
6.收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发;
7.视具体情况而定。

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