RAW 264.7细胞分化处理

时间：2021-11-14 09:41:46 点击：1725次

RAW 264.7细胞培养过程中密度过大，培养基颜色发黄都易刺激细胞分化，分化的RA264.7细胞呈多角形，体积明显增大，时常有较长的黑色触角，那么RAW 264.7细胞如何避免分化及分化该处理呢?

RAW 264.7细胞消化时不能用胰酶消化，消化会造成细胞分化，客户可以用移液枪吹打，会比巴氏吸管方便一点。

前面我们说到RAW 264.7不能用胰酶消化，许多实验室用细胞刮传代，这是一种非常经典好用的方法。在这边我们推荐“吹打传代”方法，其操作步骤简单，也能更好地控制细胞分化率。

(一)吹打传代操作步骤

1.轻拍几下培养皿

2.用1ml 的枪或者巴氏管把细胞吹下来

3.细胞吹下来后转移到15ml离心管

4.1200rpm(约250g) 离心3min

5.去上清，用新鲜培养基重悬细胞

6.按比例接种到新的培养皿中

(二)吹打传代时机

1.当细胞密度较低的时候，可能不太好吹下来。

2.当细胞密度达到80%~90%的时候，最容易吹下。

(三)操作注意事项

1.RAW 264.7细胞三天不传代更容易分化，很难吹下，每一次接种密度都要控制好;

2.分化的细胞贴壁牢固，传代的时候请勿强制性吹下这些细胞，只接种容易吹下的那些未分化细胞；

3.吹打的力度一定要轻，切勿暴力吹打；

4.细胞的贴壁性和培养器皿的材料也有关，有时RAW 264.7 会出现太容易吹下的情况，连分化细胞都贴壁较松，此时更适宜用巴氏管吹打；

5.培养时，无法保证100% 不分化，通过传代可以将分化比例控制在一定范围.