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T25瓶细胞运输收货处理

时间:2021-08-11 16:56:14 点击:1342次


本视频为厦门逸漠生物出品关于T25瓶细胞迁移步骤操作指南,我们对每一步操作都做了演示,以便实验者更好地理解常温运输细胞转移实验过程。

细胞收货处理(T25瓶)

实验准备

提前开启紫外照射30min消毒灭菌,工作台开灯通风10min,用75%酒精擦拭台面

所需试剂物品

完全培养基、胰酶、PBS

到货处理

1.在细胞间拆封包裹,阅读细胞说明书和检测报告

2.取出T25瓶,检查是否在运输过程中破损,在显微镜下镜检并拍照存档

3.放入培养箱稳定细胞状态,约2-4小时

4.2-4小时后拿出T25细胞瓶,显微镜下观察细胞状态,细胞状态稳定密度85%以上,即进行细胞转移步骤

细胞迁移步骤

第一步:吸出运输用培养基,加入5m」1xPBS清洗1遍,去掉PBS,加入2m1胰酶消化,并放入培养箱孵育1-2min

第二步:在显微镜下观察细胞是否脱落,加入3mI完全培养基终止消化,轻轻吹打细胞,使其脱离瓶壁

第三步:细胞悬液转移到15ml离心管中,1000rpm离心5min

第四步:拿出一个新的10cm培养皿,加入8-10ml完 全培养基,在皿上标记细胞名称,培养基名称,日期

第五步:离心结束后,用75%的酒精喷管身后,放回工作台中,去上清,加入1m]完全培养基,重悬后加到10cm培养皿中,放入37℃培养箱培养

注意事项

1.收到细胞后,首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系

2.静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照(当天以及第 2,3 天请拍照),记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态

3.由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决

4.仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致

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