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第五节:小鼠Corning ® Matrigel® Matrix分装教程

时间:2023-05-28 10:10:38 点击:558次

第五节:小鼠Corning ® Matrigel® Matrix分装

一、Corning ® Matrigel® Matrix使用说明

Corning Matrigel(货号356231)是由Corning公司生产的,是3D细胞培养中最常用的三维基底膜制剂;Matrigel对温度十分敏感,仅在4℃呈液态;常温下形成基底膜三维胶质结构,需要干冰运输,-20℃或-80℃储存.

注意

收货:收货时,需要注意检查泡沫箱内干冰是否足量,Matrigel液面是否基本水平,以及瓶身侧壁,瓶口有无融化的痕迹;

储存:收货确认无异常后,将Matrigel储存于-20℃冰箱,长期保存可置于-80℃冰箱。切勿储存于冰箱外侧靠门边上,最好放置于内侧角落。

颜色:康宁公司的类器官专用Matrigel冷冻状态下颜色为淡黄色,解冻后颜色为透明的白色;

(此处附上冷冻前图,解冻后图)

●常规冰箱温度波动较大,为了保证最佳使用效果,建议放在-80℃储存;第一次融化后请分装保存,避免反复冻融;

●分装前,请根据收到的 Matrigel 批号查询此批号 Matrigel 的蛋白浓度;根据使用浓度和单次类器官种板的量来计算分装体积和数量。

●使用货号为的 Matrigel(356231),蛋白浓度为8-11mg/ml,由于Matrigel(356231)比较粘稠,使用时容易产生气泡,必要时可适当稀释70% 以上。

二、分装 Corning ® Matrigel® Matrix

1.取一瓶冷冻的Matrigel,置于-4℃冰箱过夜,当Matrigel完全融化后即可开始分装;

2.准备1mL无菌吸头1盒,无菌的1.5 mL EP管若干,贴好标签(Matrigel批号,浓度,日期,操作人),放入EP冰盒上,均置于-20℃冰箱中预冷1小时以上;

3.完全融化的Matrigel为可流动的白色液体;从冰箱取出插入碎冰中;

4.将完全融化的Matrigel、预冷的1.5 mL EP管-冰盒,1mL无菌吸头转移生物安全柜内;

5.冰上混匀Matrigel,随后调整移液器刻度,准备分装;

6.分装时可用无菌剪刀将吸头尖端剪去一小段;每分装5管后更换新的吸头,以减少吸头堵塞的风险;

7.将混匀的Matrigel无菌分装于1.5 mL EP管(500 μl/管)中;将分装好的Matrigel转移至-20℃或-80℃冰箱保存;

注意

●不同货号和批号的Matrigel,浓度会有区别,具体请查询COA文件;

●切勿将Matrigel储存于自动除霜的冰箱中;在第一次融化后请分装保存;可根据每次实验用量决定分装的量,用不完的的基质胶可置于4℃存放,2周内使用完,避免反复冻融。

●Matrigel对温度十分敏感,与Matrigel接触的所有试剂耗材(离心管,移液枪头等)均需事先预冷,操作需全程在冰上进行;

●稀释的Matrigel时需要充分混匀,否则会不均匀,进而影响类器官细胞培养效果;

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